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Numéro 32 : Cytométrie en flux
La cytométrie en flux est une technique d’analyse permettant de compter et caractériser des cellules ou particules se trouvant en suspension dans un liquide . Cette technologie permet l’analyse rapide de plusieurs milliers de cellules par seconde et fournit des informations sur leurs caractéristiques morphologiques et biologiques. Aujourd’hui elle est largement utilisée pour étudier des populations cellulaires et identifier des sous-populations spécifiques.
Son principe repose sur le passage une à une et à grande vitesse des cellules devant un ou plusieurs faisceaux laser. Lors de leur passage, les cellules diffusent la lumière selon leur taille FSC, Forward Scatter capté par un capteur de l’autre côté de la cellule) et leur granularité SSC, Side Scatter capté par un capteur à 90° du faisceau laser). Elles peuvent également émettre une fluorescence lorsqu’elles sont marquées par des fluorophores ou des anticorps fluorescents. Les signaux lumineux recueillis par différents détecteurs sont convertis en données numériques, permettant une analyse simultanée de plusieurs paramètres pour chaque cellule à l’aide d’histogrammes.
La cytométrie en flux possède de nombreuses applications en recherche et en clinique. Elle est notamment utilisée pour l’immunophénotypage des cellules immunitaires, le diagnostic et le suivi des leucémies et lymphomes, l’étude du cycle cellulaire et de l’apoptose, l’évaluation de la viabilité cellulaire ainsi que la quantification de protéines, d’ADN ou d’ARN. Cette technique est également employée en microbiologie, en oncologie, en hématologie et dans le domaine des biotechnologies et des thérapies cellulaires.
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